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      梅里埃酵母菌鑒定卡相關藥敏試驗方法介紹

      發布時間: 2023-02-06  點擊次數: 363次
        梅里埃酵母菌鑒定卡在實驗室中很常見,酵母菌作為一類重要的真菌,被廣泛應用于人類的生產活動中。微基生物專注微生物多樣性研究,為高校、醫院、研究所等單位提供科研服務。不僅可以檢測土壤、水體、糞便、腸道內容物等樣本中混合微生物的種類及豐度,而且還可以提供細菌、真菌等純菌的菌種鑒定服務。
       
        梅里埃酵母菌鑒定卡菌種鑒定一般是提取純菌A的基因組DNA,然后PCR擴增16srDNA片段,之后通過一代測序或三代測序檢測16SrDNA的全長,與國際上的數據庫進行比對,默認選取比對結果中相似性高的物種分類信息,之后構建系統發育樹,然后得出樣本A與XX物種的相似性高。
       
        操作規程:
       
        1、取血平板上的單個菌落制片,做革蘭氏染色鏡檢證實為真菌。
       
        2、從冰箱取出鑒定卡(YBC),待恢復至室溫后取出編號,放到卡片架上。
       
        3、濁度計校零及100%,用裝有結晶紫的試管調零,用0.45%的鹽水管調100%。
       
        4、挑取經純化的單個菌落,用濃度為0.45%鹽水,配制成2麥氏單位濃度的菌懸液。
       
        5、放入填充箱內填充,待填充完成后用塞子封口,檢查和排除氣。
       
        6、把卡片放在30℃的孵箱內孵育18~24小時,然后放入閱讀箱內,儀器自動讀卡。
       
        7、同時做手工藥敏試驗:有2種方法:
       
        8、配制0.5麥氏單位濁度該菌液,用棉簽均勻涂于念珠菌藥敏平板上,待5min后貼相應藥敏紙片,35℃培養24~48小時,讀取低抑菌濃度(MIC)并報告。
       
        9、用0.9%生理鹽水配制0.5麥氏單位濁度該菌液,再用0.9%生理鹽水1﹕1稀釋,吸取0.5ml菌懸液到念球菌藥敏平板,用棉簽均勻涂布,棄去多余的菌懸液,放置5分鐘后貼藥片,35℃培養18~24h,測量抑菌環直徑并報告。

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